2007年8月27日,受廣東省科學(xué)技術(shù)廳委托,廣東省海洋與漁業(yè)局組織專家對(duì)珠江所完成的“海水養(yǎng)殖魚類哈維氏弧菌、溶藻弧菌二聯(lián)疫苗研究”項(xiàng)目進(jìn)行了鑒定。
該項(xiàng)目分離了海水魚類哈維氏弧菌和溶藻弧菌病原400余株,獲得了主要代表性菌株10余株;分析了兩種病原的全菌抗原和外膜蛋白(OMP)等的免疫原性以及19株弧菌的外膜蛋白OmpK基因,證明外膜蛋白OmpK是多種致病性弧菌的共同抗原;克隆表達(dá)了哈維氏弧菌外膜蛋白OmpK。實(shí)驗(yàn)室條件下,全菌滅活疫苗注射免疫相對(duì)保護(hù)率(RPS)達(dá)77%以上,浸泡免疫達(dá)55%以上;OMP疫苗注射免疫RPS達(dá)75%~87%,浸泡免疫達(dá)62%~67%;重組OmpK疫苗的注射免疫保護(hù)率高達(dá)100%。
該項(xiàng)目構(gòu)建了三種組合的二聯(lián)疫苗:哈維氏弧菌+溶藻弧菌滅活全菌二聯(lián)疫苗、哈維氏弧菌外膜蛋白復(fù)合物(OMPC)+溶藻弧菌LPS亞單位二聯(lián)疫苗、哈維氏弧菌重組OmpK+溶藻弧菌,對(duì)哈維氏弧菌和溶藻弧菌感染均有良好的保護(hù)作用,其中哈維氏弧菌重組OmpK+溶藻弧菌二聯(lián)疫苗注射免疫保護(hù)率高達(dá)100%,浸泡免疫保護(hù)率高達(dá)70%~72%。三種組合的二聯(lián)疫苗在102公頃海水養(yǎng)殖田間試驗(yàn),免疫組的魚比對(duì)照組減少損失17.26%。
該項(xiàng)目開展了哈維氏弧菌、溶藻弧菌二聯(lián)滅活疫苗生產(chǎn)與檢驗(yàn)用菌種、工廠化生產(chǎn)工藝、產(chǎn)品質(zhì)量控制、中間試制等疫苗臨床前研究,制定出弧菌疫苗生產(chǎn)使用操作規(guī)程,已申報(bào)農(nóng)業(yè)部臨床試驗(yàn)。
鑒定委員會(huì)充分肯定了該項(xiàng)目所取得的成績,認(rèn)為項(xiàng)目在哈維氏弧菌、溶藻弧菌二聯(lián)滅活疫苗以及重組OmpK疫苗研制和應(yīng)用方面具有創(chuàng)新性,項(xiàng)目成果整體達(dá)到國內(nèi)領(lǐng)先水平。